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天麻两菌及种子

分类: 三七辨别|时间:|阅读量:

补乐网导读:菌丝白色,担子果高5~22mm,单生。菌盖直径3~6mm,帽状或伞状。菌褶近直生、光滑、白色。菌柄中生、细长、中空,3~190.5~1mm。担子棒状17.5~225~7.5m,4孢,无色。孢子椭圆形。 这类真菌多

  菌丝白色,担子果高5~22mm,单生。菌盖直径3~6mm,帽状或伞状。菌褶近直生、光滑、白色。菌柄中生、细长、中空,3~19×0.5~1mm。担子棒状17.5~22×5~7.5μm,4孢,无色。孢子椭圆形。

  这类真菌多腐生在高山林间落叶上,对纤维素有很强的分解能力,地面上的枯枝朽叶,感染这类真菌而被分解。天麻种子落在林地染此菌的树叶上,可侵入天麻种子使其萌发,故小菇属萌发菌主要营腐生生活,兼性寄生。

  菌丝体,是由菌丝分枝交错形成,是此菌的基本结构。菌丝体又分菌丝和菌索。初生菌丝乳白色,镜下观察无色透明,有分隔。菌索是由无数菌丝结合在一起的根状物、幼嫩时为棕红色,有白色生长点,衰老时为黑褐色至黑色,无再生力。

  子实体成熟后释放孢子于地面,在温湿度适宜条件下萌发出初生菌丝,进而转为次生菌丝和菌索。菌索表面有鞘包着,是蜜环菌适应不良环境的特殊结构,菌索有很多分枝,向周围蔓延生长,寻找营养,故它在林间分布广泛,在10月低温、高湿的环境下可长出子实体,又释放出担孢子。

  需要的化学药品有:磷酸氢二钾(K2HPO4),磷酸二氢钾(KH2PO4),硫酸镁(MgSO4.7H2O),葡萄糖,蔗糖,维生素B1,石膏粉,琼脂,0.1%氯化汞(HgCl),75%酒精,甲醛,高锰酸钾等。

  (1)PDA培养基制备:去皮马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂20g、自来水1000ml、pH5~6。将马铃薯切片,加水煮沸30分钟,用纱布过滤,取滤液1000ml并放入琼脂加热,使之全部深化,最后加入葡萄糖。然后将培养基趁热分装于试管内,经高压灭菌(1.5kg/cm2)30分钟。取出后按25度斜度放置冷却后接种。

  (2)消毒灭菌:接种室灭菌,按每平方米用量计算:40%的甲醛溶液8ml,高锰酸钾5g进行熏蒸。先关闭窗户,取甲醛溶液装入容器中,再放入高锰酸钾,人随之离开接种室,关闭房门,熏蒸1小时即可。熏蒸后应隔1天使用。

  蜜环菌:将蜜环菌索或蜜环菌子实体用水洗净表面泥土,然后切取需要的部份组织,用无菌水冲洗3次,放入0.1%升汞溶液浸泡1分钟;再用无菌水冲洗3次,天麻两菌及种子洗去残存的药液,置于无菌培养皿内。将菌索分别剪成1cm长的小段或小块,用灭菌滤纸吸去表面附着水液,然后接种于斜面培养基上,置25℃恒温培养,3~7天左右,开始分别长出白色菌丝和菌索。分离子实体时,用无菌水冲洗消毒残存药液后,用灭菌滤纸吸净水珠,再用解剖刀从菌盖中纵向剖开了实体,在菌柄及菌盖交界处取其0.5cm的一块组织置于PDA培养基上培养。

  萌发菌:将小米麻或萌发菌子实体用水洗净表面泥土,然后切取需要的部份组织,用无菌水冲洗3次,放入0.1%升汞溶液浸泡1分钟;再用无菌水冲洗3次,洗去残存的药液,置于无菌培养皿内。用灭菌滤纸吸去附着在小米麻上的水液,用无菌镊子捣碎小米麻,然后把捣碎的汁液接种于斜面培养基上,置25℃恒温培养,3~7天左右,开始分别长出白色菌丝。分离子实体时,用无菌水冲洗消毒残存药液后,用灭菌滤纸吸净水珠,再用解剖刀从菌盖中纵向剖开了实体,在菌柄及菌盖交界处取其0.5cm的一块组织置于PDA培养基上培养。

  ② 孢子分离:萌发菌和蜜环菌的分离方法相同,即将开伞的子实体截去菌柄的下半部,用75%的酒精在菌盖表面及菌柄部分进行揩擦消毒,然后菌褶向下插在孢子收集装置的支架上。将支架放于无菌培养皿中,用钟罩或大烧杯罩住以收集孢子。孢子落于皿内后,用接种针挑取少许,接于斜面培养基上培养。

  在培养基上最初分离出的菌种,再进行提纯培养以得到优良菌种,称作纯化。萌发菌选用菌落生长速度较为一致的菌丝体,用消毒的接种铲连同培养基一起切取菌丝,转移到新的培养基上培养,重复转接可获纯菌种。蜜环菌在培养基上接种点处刚产生菌索分枝时,选择其中生长旺盛而幼嫩的菌索,用接种铲截取长2~3mm移入斜面培养基上,在25℃恒温下培养,菌索长满培养基后即为纯化的一级菌种。

  培养基成分:青冈、板栗等阔叶树的木屑77%、麸皮15%、玉米粉5.45%、蔗糖1%、石膏粉1%、磷酸二氢钾0.3%、硫酸镁0.25%,将培养料的含水量调至65%左右。然后装瓶,在瓶中心打直径1cm的圆孔,深达培养基2/3处。盖好瓶盖,高压蒸气灭菌(0.1~0.15兆帕压力,121~126℃)2小时,冷却后接种。在接种室内,将菌丝连同约蚕豆大小的母种,接于培养基的圆孔中,一支母种可接原中5瓶左右,盖好瓶盖后置25℃培养室培养。

  制作时,先将手指粗的树枝截成长1.5cm的小段,在水中浸泡10小时左右,使树枝段充分吸水,然后将上述原料按比例充分混合、用水调含水量60%左。

[来源:未知][编辑:admin]

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